Des bactéries à Gram négatif peuvent apparaître Gram + si :
- Étalement trop épais (mauvaise décoloration)
- Décolorant laissé trop peu de temps
- Solution de fushine laissée très longtemps (plus d'une minute)
- Avidité de certaines bactéries (Neisseria et Acinetobacter en particulier) pour la fuchsine donnant un rouge très foncé, difficile à distinguer d'un violet.
Préparation des réactifs : http://www.globe-network.org/fr/biologie/enseignement-a-distance/fiches-techniques-et-procedures/bioltrop/coloration-de-gram
Des bactéries à Gram positif peuvent apparaître Gram - (moins fréquent) :
- Solution iodée de Gram laissée trop peu de temps
- Décolorant laissé trop longtemps et/ou mal rincé
La lecture du Gram nécessite de l'expèrience. La forme des bactéries est aussi informative que la couleur.