La résistance des bactéries aux antibiotiques est un phénomène évolutif (résistances acquises). L’étude in vitro de l’activité de l’antibiotique sur la souche isolée du patient a pour but de prévoir l’efficacité du traitement. Toutefois, la corrélation in vitro- in vivo est difficile.
L’antibiogramme ne peut être réalisé qu’à partir de culture pure de bactéries. Les techniques classiques sont divisées en deux types de méthode : par dilution (souvent semi-automatisée en laboratoire médical : cf. identification par Vitek 2) et par diffusion. Les méthodes de diffusion ou antibiogrammes standards sont très utilisées par les laboratoires de diagnostic.
Des disques de papier buvard, imprégnés d’une quantité définie d’antibiotiques, sont déposés à la surface d'un milieu gélosé, préalablement ensemencé avec une culture pure de la souche à étudier. Dès l'application des disques, les antibiotiques diffusent de manière uniforme si bien que leurs concentrations sont inversement proportionnelles à la distance du disque. Après incubation, les disques s'entourent de zones d'inhibition circulaires correspondant à une absence de culture. A la limite des zones d'inhibition, il existe dans la gélose des concentrations d'antibiotiques égales aux CMI.
